粮食、油料检验 淀粉测定法
作者： 文章来源：中国农业标准网 点击数： 发布时间：2010-06-13
本标准适用于商品粮食、油料淀粉含量的测定。
1 仪器和用具
1.1 古氏坩埚：25ml;
1.2 抽滤瓶：500ml;
1.3 真空泵或水泵；
1.4 滴定管：25ml;
1.5 锥形瓶：100ml、250ml、500ml;
1.6 移液管：20ml;
1.7 容量瓶：100ml、250ml、500ml;
1.8 回流冷凝管；
1.9 电炉；
1.10 烧瓶：150ml;
1.11 漏斗：6cm;
1.12 研钵、温度计、显微镜等。
2 试剂
2.1 0.5％淀粉酶溶液或麦芽汁：取大麦粒加水湿润浸泡12h，在搪瓷盘内平铺约1cm厚，使其发芽数日。待幼芽长约1cm时，取发芽粒50g，磨碎，加水400ml，在常温下浸渍3h，过滤备用(保存时加氯仿或甲苯数滴，防止生霉)；
2.2 碘溶液：称碘化钾3.6g, 溶于20ml水中，加碘1.3g，溶解后再加水至100ml；
2.3 0.1N高锰酸钾标准溶液；
2.4 1N氢氧化钠溶液：取氢氧化钠4g加水溶解至100ml;
2.5 硫酸铁溶液：取硫酸铁50g，加水200ml溶解后，馒慢加入硫酸100ml，冷后加水至1000ml;
2.6 3N盐酸: 取盐酸25ml，加水至100ml;
2.7 6N盐酸：取盐酸100ml，加水至200ml;
2.8 20％氢氧化钠溶液；
2.9 甲基红指示液：0.1％甲基红乙醇溶液；
2.10 费林氏溶液：
2.10.1 碱性酒石酸铜甲液：取硫酸铜结晶34.69g，加适量水溶解，加硫酸0.5ml，再加水至500ml，用精制石棉过滤；
2.10.2 碱性酒石酸铜乙液：取酒石酸钾钠173g与氢氧化钠50g，加适量水溶解，稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内；
2.11 精制石棉：先用3N盐酸将石棉浸泡2～3日后，用水洗净。再加10％氢氧化钠溶液浸泡2～3日，倾去溶液，用热碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时,用水洗净。再以3N盐酸浸泡数小时，用水洗至不呈酸性，使之成为微细的软纤维，用水浸泡贮存于玻璃瓶内，作填充古氏坩埚用。
3 操作方法
称试样2～5g，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用乙醚50ml分5次洗除脂肪, 再用85％乙醇洗去可溶性糖类，将残留物移入250ml烧杯内，用水约50ml分几次将滤纸上残渣洗入烧杯中，放到沸水浴中加热15min，使淀粉糊化, 放冷至60℃，加淀粉酶溶液(或麦芽汁)20ml，维持55～60℃水解1h，经常搅拌。然后取1滴加碘液1滴,如显蓝色,再加热糊化,并加淀粉酶溶液(或麦芽汁)20ml，水解至碘液不呈蓝色为止。加热至沸腾，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，混匀。过滤，弃去初滤液，取50ml注入100ml容量瓶中，加6N 盐酸5ml，在68～70℃水浴中加热15min，冷后加甲基红指示液2滴，用20％氢氧化钠溶液中和,加水至刻度,混匀,用以测定还原糖。同时取水50ml和同量的淀粉酶溶液(或麦芽汁)作试剂空白试验。
4 结果计算
淀粉干基含量按下列公式计算：
5000 × 0.9 (A[$DHZ_SingleQuotes$] - B)
淀粉(干基%) = ────────────
W × V (100 - M)
式中：A[$DHZ_SingleQuotes$]-- 转化后测得的还原糖(以葡萄糖计)重量，mg;
B -- 试剂空白相当于还原糖(以葡萄糖计)重量，mg;
V -- 转化后稀释为100ml，测定还原糖的体积，ml;
W -- 试样重量，g;
M -- 试样水分百分率，％；
0.9 -- 还原糖(以葡萄糖计)换算为淀粉的因数。
双试验结果允许差不超过平均值的1%,取平均值作为测定结果。测定结果取小数点后第一位。
注:
① 自制淀粉酶: 取已发芽的麦粒,放在25～35℃温度下干燥,磨成粉末。每100g粉末加20％乙醇200ml，浸泡24h后,用细布压榨并过滤, 加双倍滤液量的乙醇进行沉淀。沉 淀经布氏漏斗抽滤后,再置乳钵中与乙醇一起研磨,再抽滤,沉淀用乙醇和乙醚洗涤,最后在硫酸干燥器中干燥后备用。
② 试样含脂肪量很少时，可不用乙醚洗涤。
③ 在使用淀粉酶前,可用已知含量的淀粉糊溶液少许,加定量的淀粉酶溶液,置55～60℃水浴上加热1h，用碘溶液观察,经水解后蓝色是否减退或消失,以确定酶的活力及水解时所需用量。一般淀粉酶活力为1：25，1：50及1：100。
|
|
|
